<li id="r4p7v"></li>
    <li id="r4p7v"></li>

        <span id="r4p7v"></span>
      1. 當前位置:

        首 頁 > 技術文章 > 傳代細胞培養
        產品搜索 Search

        技術服務Article

        傳代細胞培養
        更新時間:2017-05-31 點擊次數:2073次

        傳代細胞培養

        實驗原理:
        傳代細胞的培養使用已成功構建的細胞株,大量培養狀態良好的同種細胞,并維持細胞種的延續。傳代培養是細胞培養常規操作之一,也是所有細胞生物學實驗的基礎。傳代細胞根據細胞的生長習性可分為貼壁細胞和懸浮細胞。

        實驗流程:

        1.觀察培養基是否正常,細胞狀態如何,細胞密度如何,決定是否傳代。觀察時擰緊蓋子。
        2.加熱PBS、versene、培養基,(提前做好) 瓶子不要倒著放,不要讓液體接觸到瓶塞。
        3.打開超凈臺(先開風機,后開照明),用75%乙醇清潔臺面,點燃酒精燈。不要把廢液缸拿出去倒,如果廢液太多,可以用其他容器先裝廢液。取小離心管一個,置于架子上。
        4.取尖吸管、吸量管各一支,放置在的架上。放置的方式,注意吸管、吸量管前端都不要與架子接觸。
        5.取待傳代的細胞。打開versene,用酒精燈外焰燒。燒吸管時距離酒精燈心遠些,不要把渣滓帶進去。把試劑拿入臺子的時候,盡量平穩,不要讓試劑碰到瓶口。
        6.用吸量管吸取舊的培養基,置離心管中,吸量管加入versene,然后將versene瓶收起來。(加versene主要是為了將舊培養基洗去)。在離心管中間部分將液體加入。吸液體和加液體時都不要對著細胞。
        7.打開胰酶,然后將versene棄掉。換新管,用尖吸管吸取適量胰酶加入。加胰酶后,盡快放平,使細胞消化時間一致。
        8.將細胞放入37度孵箱。放孵箱2min, 收胰酶,打開PBS. 之后拿出來鏡下隨時觀察。使用二次消化法,去除容器中殘余的細胞。別忘了用舊培養基中和。
        9.取細胞,鏡下觀察消化情況。消化程度合適之后(細胞變圓,但不漂起),用尖吸管棄去胰酶,取離心管中的培養基加入細胞,吹打,至所有細胞從培養皿底部脫落下來。用PBS洗細胞,versene對細胞有毒性,且不能被血清中和。然后吸取至離心管中,800 rpm離心5分鐘。
        10.吸量管吸取適量培養基加入新的培養皿中。
        11.細胞離心畢,用吸新培養基的管棄去上清,先把泡沫吸走。換吸量管吸取培養皿中培養基適量,加入離心管,小體積混勻,將細胞重懸,尖吸管吹勻。
        12.擦計數板,用槍吸10ul的液體,計數。不要把槍伸到離心管內。
        13.吸量管吸取細胞懸液,加入新的培養皿中。鏡下觀察,搖勻,放入37度孵育。收超凈臺。

        科研和臨床應用:

        傳代細胞細胞可用于所有細胞實驗,常用于進行細胞增殖、細胞凋亡、細胞侵襲和藥物實驗等多方面的研究。
         

         

        主站蜘蛛池模板: 亚洲成a人片在线观看播放| 亚洲第一黄色网址| 91嫩草亚洲精品| 日本最新免费网站| 亚洲精品在线不卡| 成人黄色免费网址| 亚洲乱码一二三四区乱码| 免费99精品国产自在现线| 亚洲国产91在线| 麻豆国产入口在线观看免费| 亚洲精品成a人在线观看夫| 成人免费看吃奶视频网站| 亚洲日韩av无码中文| 日日夜夜精品免费视频| 深夜a级毛片免费视频| 亚洲人成网站在线观看播放| 久久九九AV免费精品| 亚洲一级特黄特黄的大片| 国产精品无码免费视频二三区| 美女免费视频一区二区三区| 亚洲一区日韩高清中文字幕亚洲| a级黄色毛片免费播放视频| 亚洲国产精品成人精品无码区 | 久久久久亚洲AV无码网站| 亚洲最大免费视频网| 亚洲av片在线观看| 亚洲综合国产精品第一页| 99爱在线观看免费完整版| 亚洲国产精品免费观看| 亚洲成A∨人片天堂网无码| 国产精品区免费视频| 亚洲国产精品成人综合色在线| 中文亚洲成a人片在线观看| 无码人妻久久一区二区三区免费| 亚洲av永久无码嘿嘿嘿| 亚洲AV伊人久久青青草原 | 亚洲www在线观看| 亚洲M码 欧洲S码SSS222| 91精品导航在线网址免费| 亚洲av无码成人精品区一本二本| 亚洲精品无码不卡在线播放HE |