由于結腸癌耐藥細胞株在長期的保存?zhèn)鞔^程中，受到各種不穩(wěn)定因素影響。例如細胞遺傳污染和基因變異等。故經過一段時間之后，腫瘤細胞的遺傳物質可能發(fā)生變異，并導致其生物學特性的改變，從而降低腫瘤動物模型的均一性和可比對性。因此要想保證腫瘤動物模型的穩(wěn)定性，必須對結腸癌耐藥細胞株進行質量監(jiān)控。
 

　　腫瘤細胞實質就是腫瘤。腫瘤組織由實質和間質兩部分構成，腫瘤實質是腫瘤細胞，是腫瘤的主要成分，具有組織來源特異性。它決定腫瘤的生物學特點以及每種腫瘤的特殊性。通常根據(jù)腫瘤的實質形態(tài)來識別各種腫瘤的組織來源，進行腫瘤的分類、命名、和組織學診斷，并根據(jù)其分化成熟程度和異型性大小來確定腫瘤的良惡性和腫瘤的惡性程度。腫瘤細胞有三個顯著的基本特征即：不死性，遷移性和失去接觸抑制。除此之外，腫瘤細胞還有許多不同于正常細胞的生理、生化和形態(tài)特征。
 

　　結腸癌耐藥細胞株培養(yǎng)：
 

　　1.取出小鼠后瀝干酒精，放入超凈臺內，固定在泡沫板上。
 

　　2.用鑷子提起皮膚，用解剖剪剪開皮膚一個橫切口，將皮膚向上撕開，然后剪開肌肉等，暴露出腹腔，在左側找到脾臟，用彎頭眼科鑷取出脾臟，置于無菌培養(yǎng)皿中。
 

　　3.用生理鹽水將取出的脾臟清洗多次，并剔除多余無用的組織。
 

　　4.將篩網(wǎng)置于平皿中，脾臟置于篩網(wǎng)上，用彎頭鑷鑷住，輕輕在篩網(wǎng)上進行碾磨，同時不停滴加不含血清的培養(yǎng)液沖洗。
 

　　5.將碾磨好的細胞懸液吸入至離心管中，離心(1000rpm,5min)，吸去上清(去除血液等)。
 

　　6.加入10ml培養(yǎng)液，吹打混勻，取樣計數(shù)。
 

　　7.將稀釋好的細胞懸液分裝于培養(yǎng)瓶中，輕輕搖晃混勻，在培養(yǎng)瓶上。
 

　　結腸癌耐藥細胞株復蘇步驟：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
 

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