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        人肺癌細胞培養(yǎng)的相關(guān)知識
        更新時間:2016-06-27 點擊次數(shù):2247次
            
          在細胞凍存時加入溫保護劑,能大大提高凍存效果。常用的低溫保護劑是DMSO,它是一種滲透性保護劑,可迅速透入細胞,提高胞膜對水的通透性,降低冰點,延緩凍結(jié)過程,能使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外,在胞外形成冰晶,減少胞內(nèi)冰晶,從而減少冰晶對細胞的損傷。細胞的凍存:先將凍存管放入4℃冰箱,約40min。接著置于-20℃冰箱,約30-60min。再接著置于-80℃超低溫冰箱中放置,置于液氮罐中長期保存。同時做好凍存記錄,在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄??傊?細胞的復(fù)蘇應(yīng)遵守慢凍快融的原則。
          
          人肺癌細胞培養(yǎng)注意事項:
          
          1、實驗進行前,無菌室及無菌操作臺以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)10分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺運轉(zhuǎn)10分鐘以上后,再進行下一個細胞株之操作。
          
          2、無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置,其它實驗用品用完即應(yīng)移出,以利于氣流之流通。實驗用品以70%ethanol擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在抬面之中央無菌區(qū)域,勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。
          
          3、工作人員應(yīng)注意自身之安全,須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
          
          
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