<li id="r4p7v"></li>
    <li id="r4p7v"></li>

        <span id="r4p7v"></span>
      1. 當前位置:

        首 頁 > 技術文章 > 熒光定量PCR儀有哪些選擇誤區?
        產品搜索 Search

        技術服務Article

        熒光定量PCR儀有哪些選擇誤區?
        更新時間:2016-07-25 點擊次數:1377次
            
          誤區一:儀器通道越多越好
          
          隨著PCR技術的成熟運用,多重擴增越來越熱鬧,熒光定量PCR儀也不能幸免。從zui初ABI公司推出的單通道熒光定量PCR儀發展到如今各個廠家都推出4通道、5通道甚至6通道熒光定量PCR儀,眼花繚亂的選擇讓人無所適從,就有人一不小心走進了“通道越多越好”的誤區。
          
          在使用有些廠家5通道的熒光定量儀時,為了確保實驗結果的性和準確性都要在實驗中使用ROX(一種熒光染料)或的Referencedye,這些熒光染料都必須單獨使用一個檢測通道。這樣以來,真正能檢測多重PCR熒光信號的有效通道只有4個,而且使用校正染料可能會增加后期的使用成本。有的熒光定量PCR的檢測通道是只為自已廠家的的熒光染料或試劑開放的,有效檢測通道也絕非像宣傳資料中宣稱的那么多。在購買前確認熒光定量PCR儀器的有效檢測通道尤為重要,不能單單只聽宣傳。
          
          考慮多重熒光定量PCR的通道數的時候也應該從實驗室實際情況出發,多重PCR并非人人適用、人人可用,因為它使實驗復雜化了。
          
          誤區二:real-timePCR儀無需梯度功能
          
          對于使用染料法的定量PCR反應,雖然有各種各樣的PCR引物設計軟件或者經驗公式計算熔解溫度(Tm值),但運用的公式不同、引物序列不同,Tm值的差異會很大。引物的熔解溫度決定了退火溫度。而且模版中堿基的組合千變萬化,對于特殊片斷,經驗公式得到的數據不一定能得出準確的結果,退火溫度細微的差異對結果都可能產生決定性的影響,因而“摸條件”一度是讓人很頭疼的問題。梯度PCR的出現部分解決了一些問題——在反應過程中每個孔的溫度控制條件可以在范圍內按照梯度變化,根據結果,一步就可以摸索出的反應條件。
          
          不單退火溫度,連變性溫度和延伸溫度都可以優化——對于多種聚合酶混合酶擴增如Invitrogen、Clontech、Promega的多數高保真Taq酶來說這個非常重要,因為Taq和校正酶的*反應溫度可能有顯著差異,優化延伸溫度就顯得很重要。
          
          
        主站蜘蛛池模板: 成全视成人免费观看在线看| 一个人免费观看视频在线中文| 久久免费视频精品| 亚洲成AV人片在线观看ww| 国产激情久久久久影院老熟女免费| 国产免费黄色大片| 免费一级特黄特色大片| 国产成人无码免费视频97| 久久久久久久久无码精品亚洲日韩| 噜噜嘿在线视频免费观看| 亚洲女子高潮不断爆白浆| 四虎国产精品免费视| 黄色一级免费网站| 久久久久久A亚洲欧洲AV冫| 大地影院MV在线观看视频免费| 亚洲av无码一区二区三区不卡| 国产成年无码久久久免费| 亚洲人成在线影院| 大地资源二在线观看免费高清| 亚洲七久久之综合七久久| 日本中文一区二区三区亚洲| 美女巨胸喷奶水视频www免费| 亚洲欧洲日产国码无码网站| 亚洲视频免费在线观看| 亚洲精品第一综合99久久| 四虎影视永久免费观看| 成年免费a级毛片免费看无码| 亚洲最大福利视频网站| 成视频年人黄网站免费视频| 精品国产_亚洲人成在线| 亚洲性久久久影院| 中文免费观看视频网站| 亚洲av永久中文无码精品综合| 亚洲国产精品日韩专区AV| 久久青草免费91观看| 亚洲色无码国产精品网站可下载| 亚洲精品国产高清嫩草影院| 99热这里有免费国产精品| 最新亚洲人成无码网www电影| 亚洲av无码潮喷在线观看| 男女交性永久免费视频播放|