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        stathmin蛋白促進(jìn)人SMMC-7721肝癌細(xì)胞增殖侵襲能力

        更新時(shí)間:2014-07-09 點(diǎn)擊次數(shù):4270次
          近日,瀘州醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究中心研究人員發(fā)表論文,旨在構(gòu)建微管解離蛋白stathmin過表達(dá)的人SMMC-7721肝癌細(xì)胞株,并探討stathmin過表達(dá)對肝癌細(xì)胞增殖侵襲的影響。研究指出,stathmin的過表達(dá)能促進(jìn)人SMMC-7721肝癌細(xì)胞的增殖侵襲能力。該文發(fā)表在2014年第10期《重慶醫(yī)學(xué)》雜志上。
         
          采用脂質(zhì)體將Flag-pcDNA3.1-stathmin重組質(zhì)粒和Flag-pcDNA3.1空質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染人SMMC-7221肝癌細(xì)胞,抗生素加壓篩選,構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)stathmin的SMMC-7721細(xì)胞(實(shí)驗(yàn)組),以穩(wěn)轉(zhuǎn)空質(zhì)粒的細(xì)胞為對照組,Western blot對建系細(xì)胞進(jìn)行鑒定。采用CCK-8和軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞增殖;流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期;體外細(xì)胞運(yùn)動侵襲實(shí)驗(yàn)(Transwell)測定細(xì)胞的運(yùn)動、侵襲能力。
         
          實(shí)驗(yàn)組中stathmin的表達(dá)0.76±0.12較對照組0.16±0.05明顯增加(P<0.05),成功構(gòu)建了過表達(dá)stathmin的人SMMC-7721肝癌細(xì)胞株;CCK-8和軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)顯示,實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞增殖較對照組明顯增加(A4500.60±0.05 vs.0.29±0.03,P<0.01);實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞凋亡降低[(5.80±0.33)%vs.(11.57±1.09)%,P<0.05],細(xì)胞周期阻滯在G2/M期;Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí),與對照組比較,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞運(yùn)動和侵襲能力均顯著加強(qiáng)[運(yùn)動實(shí)驗(yàn)透膜細(xì)胞數(shù):(54.03±7.21)個(gè)vs.(130.45±14.13)個(gè);侵襲實(shí)驗(yàn)透膜細(xì)胞數(shù):(17.75±2.52)個(gè)vs.(57.76±8.50)個(gè)],差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

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