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細胞凋亡檢測/annexin V檢測/annexin V/PI檢測

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更新時間: 2017-08-02

細胞凋亡檢測/annexin V檢測/annexin V/PI檢測
細胞凋亡(Apoptosis):多細胞有機體為調控機體發育、維持內環境穩定,由基因控制的細胞主動性死亡過程。多細胞生物體內,某些細胞的死亡是個體發育中一個預定的,并受到嚴格程序控制的正常組成部分。

產品介紹:

 

細胞凋亡檢測

服務簡介:

細胞凋亡(Apoptosis):多細胞有機體為調控機體發育、維持內環境穩定,由基因控制的細胞主動性死亡過程。多細胞生物體內,某些細胞的死亡是個體發育中一個預定的,并受到嚴格程序控制的正常組成部分。不同于一般的細胞壞死(cell necrosis)。細胞凋亡是指由基因控制的細胞自主有序死亡的主動過程,涉及一系列基因的激活、表達以及調控等的作用。針對凋亡時期不同,檢測的方法有所不同。
    提供的細胞凋亡檢測技術服務包括有Annexin V/PI雙染檢測細胞早期凋亡和TUNEL法檢測細胞晚期凋亡, 可用于檢測不同類型、不同處理方式、不同時期細胞凋亡狀況及分析凋亡細胞比例。

一、流式細胞儀檢測細胞凋亡——Annexin V/PI 雙染色法

原理:在細胞凋亡早期位于細胞膜內側的磷脂酰絲氨酸(PS)遷移至細胞膜外測。磷脂結合蛋白V(Annexin V)是一種鈣依賴性的磷脂結合蛋白,它于PS具有高度的結合力。因此,Annexin V可以作為探針檢測暴露在細胞外測的磷脂酰絲氨酸。故利用對PS有高度親和力的Annexin V,將Annexin V標記上熒光素(如異硫氰酸熒光素FITC),用流式細 胞儀即可檢測凋亡細胞。細胞發生凋亡時,膜上的PS外露早于DNA斷裂發生,因此Annexin V染色法檢測早期細胞凋亡較TUNEL法更為靈敏;Annexin V染色法不需固定細胞,可避免PI染色因固定造成的細胞碎片過多及TUNEL法因固定出現的DNA片段丟失。因此,Annexin V法更加省時,簡單,結果更為可靠,是目前zui為理想的檢測細胞凋亡的方法。

二、TUNEL

 原理:TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)細胞凋亡檢測試劑盒是用來檢測組織細胞在凋亡早期過程中細胞核DNA的斷裂情況。其原理是熒光素(fluorescein)標記的dUTP在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT Enzyme)的作用下,可以連接到凋亡細胞中斷裂DNA的3’-OH末端,并與連接辣根過氧化酶(HRP,horse-radish peroxidase)的熒光素抗體特異性結合,后者又與HRP底物二氨基聯苯胺(DAB)反應產生很強的顏色反應(呈深棕色),特異準確地定位正在凋亡的細胞,因而在光學顯微鏡下即可觀察凋亡細胞;由于正常的或正在增殖的細胞幾乎沒有DNA斷裂,因而沒有3‘-OH形成,很少能夠被染色。本試劑盒適用于組織樣本(石蠟包埋、冰凍和超薄切片)和細胞樣本(細胞涂片)在單細胞水平上的凋亡原位檢測。還可應用于抗腫瘤藥的藥效評價,以及通過雙色法確定細胞死亡類型和分化階段。

服務流程:
Annexin V/PI雙染檢測調亡(適用于細胞早期凋亡檢測)
1.細胞培養及接種
2.誘導細胞凋亡
3.細胞收集、計數
4.Annexin V/PI標記
5.流式細胞儀檢測
6.結果分析
TUNEL法檢測細胞凋亡(適用于細胞晚期凋亡檢測)
1.標本預處理
2.內源性過氧化物酶滅活
3.TdT酶反應
4.生物素標記
5.染色
6.封片觀察

 

收費標準/服務周期/提供結果:
詳談,我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協議。

【本公司合作項目】
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